鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。
实验制备
实验目的:
鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于培养瓶内。
实验设备及材料:
大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75酒精、0。1醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。实验内容:
1、制备鼠尾胶原(两个同学一组操作)。
2、切割小玻片。
3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。
实验步骤:
制备鼠尾胶原:
1、取大鼠尾巴洗净,75酒精浸泡5分钟;
2、手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的尖端,折断尾骨后拉出尾腱;
3、将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡;
4、重复步骤2、3,直至尾腱量够用;
5、吸去生理盐水,将尾腱称重(0。51克);
6、将尾腱置于平皿内剪碎,转移至三角烧瓶中;
7、按每克尾腱50ml的比例,加入0。1醋酸溶液;
8、摇晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4放置一星期;
9、离心,4000转分,1015分钟;
10、吸取上清,分装成小瓶,4保存。
鼠尾I型胶原蛋白
简介
鼠尾I型胶原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkeda...
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