液态生物芯片技术是一种以徽球为基础的多指标数据采集和分析平台,起源于流式细胞仪。多指标检测是指在一个简单的试管中对一份样本同时进行多种指标的分析。
定义
目前,在核酸和蛋白质研究领域出现了一种全新的、称之为悬浮式点阵(suspensionaaal)的检测手段和技术,该技术在很大程度上依赖最近在光电转换和数字信号处理的进步,通过一束激光识别高分子(如聚苯乙烯)微球所产生的特异性荧光,另一束激光识别微球表面发生生物学反应后所产生的荧光信号,荧光编码不同的微球来实现检测指标的分类,进而实现高通量生物样品的分析;而通过生物学反应所产生的荧光信号可以实现分析的特异性。目前,这种基于荧光编码微球的高通量分析技术可提供快速、敏感、对一个样品进行至多可达100个分析指标的检测。分析荧光微球的速度最高可达500()个秒。应用时,把对应不同检侧物的乳胶颗粒混合后再加人微量样品在悬液中与微球进行特异性结合。结合的结果可以在瞬间经激光判定后由电脑数据信息的形式记录下来。因为分子杂交是在悬浮溶液中进行,检测速度快,所以又有“液态生物芯片”之称。
技术原理
在1977年流式细胞仪首次以微球作为基础用于免疫分析。由于流式细胞仪有区分不同大小和颜色微球的能力,使得这种方法可以用于不同类别微球群的分析。应用不同大小微球同时进行不同指标分析的概念最初是由Homn等提出的〔’:。通过流式细胞仪用两种不同大小的微球可以同时检测两种不同的抗体,随后发展成用四种不同大小的微球检测四种不同特性的抗免疫缺陷病毒(HIV)抗体91;}1oLa大小进行区分的微球允许同时对多种指标进行分析,但是小微球的聚集物与大微球不能很好的区分开来,限制了这种以大小区分微球的应用范围。相比之下,用可以产生两种不同波长染料对相同大小的微球进行染色,以区分不同微球的方...
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