含维甲酸壳聚糖纳米颗粒聚己内酯聚乙烯吡咯烷酮同轴电纺纤维

　　ColloidsSurf。BBiointerfaces：含维甲酸负载壳聚糖纳米颗粒的聚己内酯聚乙烯吡咯烷酮同轴电纺纤维用于骨再生
　　DOI：10。1016j。colsurfb。2020。111110
　　藜芦酸（3，4二甲氧基苯甲酸）（VA）是一种具有治疗潜力的疏水性酚类植物化合物，但迄今为止尚未报道其可促进骨骼再生。此外，疏水性化合物的递送通常在体内受到阻碍，因此降低了它们的生物利用度。在这项研究中，发现VA具有成骨潜能，并且通过纳米粒子嵌入同轴电纺纤维促进了其持续递送。对聚己内酯聚乙烯吡咯烷酮（PCLPVP）进行同轴静电纺丝，包裹VA负载的壳聚糖纳米粒子（CHSNP）。纤维表现出良好的理化和材料特性，并且与小鼠间充质干细胞（mMSCs）具有生物相容性。当mMSCs在同轴纤维上生长时，VA可促进这些细胞向成骨细胞分化，钙沉积反映了这一点。研究发现，在PCLPVPCHSNPVA纤维上生长的mMSCs中，一种重要的骨转录调节因子Runx2和其他分化标志物如碱性磷酸酶、型胶原和骨钙素的mRNA表达均上调。总体而言，该研究描绘了一种以持续方式促进骨再生的植物化合物VA的递送。
　　图1。VA处理刺激的mMSCs中Runx2mRNA表达。分别用100、150和200M浓度的VA处理细胞72小时。提取总RNA并进行RTqPCR分析。使用RPL13AB作为内部对照，计算Runx2mRNA的相对表达。实验一式三份进行。表示与对照相比显著增加（p0。05）。
　　图2。（A）CHSNP和CHSNPVA的SEM图像，（B）CHSNP和CHSNPVA的TEM图像。（C）PCL、PCLPVA和PCLPVPCHSNPVA纤维的SEM图像。
　　图3。（A）纯组分（CHS，TPP，VA，PCL，PVP）、CHSNP、CHSNPVA（100、150、200M）和同轴电纺纤维（PCLPVP、PCLPVPCHSNP和PCLPVPCHSNPVA）的FTIR光谱。（B）纯组分（CS，TPP，VA，PCL，PVP）、CHSNP、CHSNPVA（100、150、200M）和同轴电纺纤维（PCLPVP、PCLPVPCHSNP和PCLPVPCHSNPVA）的XRD衍射图。
　　图4。（A）生物矿化研究是在SBF中将PCL、PCLPVP、PCLPVPCHS和PCLPVPCHSNPVA电纺纤维孵育7天完成的。借助SEM成像、XRD（插图）和（B）EDS元素分析对纤维进行了评估。
　　图5。在1XPBS中孵育25天后，评估了同轴电纺纤维（PCLPVPCHSNPVA负载的浓度分别为100、150和200M）中的VA释放，并绘制了释放率。
　　图6。mMSCs在含有100、150或200MVA的PCLPVPCHSNP或PCLPVPCHSNP同轴电纺纤维上培养72小时后的细胞计数。实验一式三份进行。在此过程中使用了MUSE自动细胞分析仪，并检查了活细胞和死细胞的图形分区。左、右和下象限分别表示活细胞、死细胞和碎片。
　　图7。在细胞水平上的成骨细胞分化。（A）和（B）将茜素红染料添加到在PCLPVPCHSNP或PCLPVPCHSNPVA（100、150和200M）纤维上培养14天的mMSCs中。在405nm处定量钙沉积，并绘制了不同样品的图表。（C）和（D）对在细胞上培养14天的mMSCs进行vonKossa染色。通过黑点识别钙沉积，并使用ImageJ软件进行定量，并绘制成图表。实验一式三份进行。表示与PCLPCPCHSNS纤维相比显著增加（p0。05）。
　　图8。在分子水平上的成骨细胞分化。将mMSCs在PCLPVPCHSNP或PCLPVPCHSNSVA同轴电纺纤维上培养7天。分离总RNA，并使用（A）Runx2、（C）ALP和（D）Col1的引物进行cDNA合成和qPCR分析。实验一式三份进行。表示与PCLPVPCHSNP相比显著增加（p0。05）。（B）将mMSCs在PCLPVPCHSNP或PCLPVPCHSNSVA同轴电纺纤维上培养7天。制备全细胞裂解物，并使用所示抗体进行蛋白质印迹分析。
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